天津生药微生物菌种定向改良实验服务 **** 上海朝瑞生物科技供应

研究内容：微生物抗逆基因分离和抗逆机制的研究。利用基因工程技术将抗逆基因转入微生物、植物，培养抗逆性强的优良品种；同时开展抗逆代谢物质-海藻糖对医药、疫苗等生物活性物质保护作用的应用研究。

承担课题：国家"九五"攻关项目"酵母深度利用"；国家自然科学基金面上项目"酵母海藻糖合成酶基因对提高植物抗逆性能的研究"。

研究进展：经卫星搭载，诱变选育了高产海藻糖酵母菌株，经中试放大，细胞内海藻糖含量占细胞干重的23%；从上述高产菌株中应用PCR技术分离获得海藻糖合成酶基因--otsA，采用植物基因工程方法将此基因导入***，天津生药微生物菌种定向改良实验服务，各项检测表明otsA基因的转入改变了植物的糖代谢途径，提高了抗干燥、耐盐等抗逆特性；获得高纯度海藻糖产品，天津生药微生物菌种定向改良实验服务，并用于兽用疫苗活性保护研究。

主要成果：在国内**刊物发表论文4篇；主持完成"酵母深度利用"的"九五"攻关课题，天津生药微生物菌种定向改良实验服务，其中"利用返回式卫星选育高产海藻糖菌株"的成果通过专家鉴定，被认定为科技部攻关成果。 即不再局限于对单一基因或蛋白质的研究；天津生药微生物菌种定向改良实验服务

    将突变菌库中的带有不同遗传性状的正变菌株基因进行多亲本融合，在全基因组范围内随机交换基因，通过筛选，剔除基因组中的不利的变异基因，在递推式融合中，将突变菌株库中的有利基因逐渐积累，从而完成跳跃性人工进化.基因组重排育种技术主要分五步：、突变菌株库的建立基因组重排育种技术首先会构建一个包含不同遗传特性的突变菌株库，其中的亲本拥有多种多样的基因，在后续的递推式原生质体融合时，不同的优良性状可以进行剪接，然后统一集中到融合体中.通常，突变菌株库可借助自然分离、诱变育种等常见技术建立，从而获得更多带有多样性基因的亲本.、亲本的筛选当利用诱变育种技术进行微生物菌种选育时，“选”与“育”要结合起来，提高诱变效率.首先进行“育”：通过各种诱变手段（如物理诱变、化学诱变等），使菌株产生基因型突变，但该突变是不定向的，只有极少部分是正突变；再进行“选”：借助各种筛选方法筛选出具有某特定表型的突变株，如能够耐受不良环境（如某种浓度的***、前体或不同的pH等），从绝大部分的负突变中快速筛选出正突变，进一步提高筛选效率.、亲本原生质体的制备原生质体融合技术是基因组重排技术的基础。江苏农业微生物菌种定向改良工艺服务将有助于特定基因靶标的甄选；

自然分离得到的原始菌种远不能达到工业生产要求,通过菌种改良获得高产菌种是有效的手段。传统方法虽然无需了解过多遗传背景就能取得成效,但往往耗时费力。随着DNA重组技术、原生质体融合、组学研究的应用日益***,微生物菌种改良的新方法和新策略诸如代谢工程、基因组改组和系统生物技术、核糖体工程、表观遗传修饰等逐步发展起来。以下综述了近年来菌种改良相关领域方法和策略特别是***报道的表观遗传修饰的***进展。。。。。。。。

    链霉菌分子生物学研究组研究内容：微生物发育分化和微生物次生代谢的分子调控。以链霉菌为模式系统，研究发育分化中基因的时空表达及其作用的分子机制，为揭示生命现象的基本规律提供理论依据。研究微生物次生代谢的生物合成途径及其基因的特异调控和全局调控，为定向改良生产菌的生产能力和获得新的代谢产物提供理论指导。承担课题：国家自然科学基金重点项目"原核生物发育与分化"；国家自然科学基金面上项目"乳酸乳球菌食品级基因克隆表达系统的研究"和"与链霉菌分化有关的调控基因scrX的结构及调控机理研究"；国家杰出青年科学基金"圈卷产色链霉菌尼可霉素生物合成基因簇的克隆及序列分析"；国际合作项目"微生物活性物质的生物转化"；中科院重要方向"嗜盐菌遗传转化系列的构建及其应用"。研究进展：研究了与链霉菌发育和分化有关的重要基因-scrX和samR及，该基因的阻断，使链霉菌的发育停止在气生菌丝阶段。samR在链霉菌发育的早期有重要作用，主要在链霉菌从基质菌丝到气生菌丝形成的发育转变中起调控作用。完成了尼可霉素生物合成全部基因簇的DNA序列分析，结果揭示在35kb的DNA序列中含有26个基因，这些基因已送GenBank登录，大部分是未见报道的新基因。外界诱导或刺激来有效地促进融合，而融合模型的理性设计与后续的突变菌筛选密不可分。

    叶秀云.利用基因组重排技术选育高产洛伐他汀红曲菌株[J].福州大学学报（自然科学版）,2017(5):754-760.[5]仝倩倩.高通量筛选及基因组重排选育维吉尼亚霉素高产菌[D].2018.[6]ZhangJ.,LiuC.,XieY.,etfructooligaridesductionbygicivementoftheindustrialfungusAspergillusnigerA20611[J].JournalofBiotechnology,2017,249:25-33.[7]YeM.,YueT.,YuanY.,etductionofyeasthybridsforivementofciderbytoplastelectrofusion[J].BiochemicalEngineeringJournal,2013,81:162-169.[8]WangHK.,SunY.,ChenC.,[J].FoodControl,2013,32(2):341-347.[9]GérandoH.,Mátéde.,Fayolle-GuichardF.,[J].AppliedMicrobiologyandBiotechnology,2016,100(12):5427-5436.[10]YinH.,MaY.,DengY.,[J].JournalofMicrobiologicalMethods,2016,127:188-192.[11]TongQQ.,ZhouYH.,ChenXS.,[J].Bicess&BiosystemsEngineering,2018。在利用物理或化学方法损伤原生质体生理结构使其失去再生能力后；江苏农业微生物菌种定向改良工艺服务

基因组重排利用多轮递推原生质体融合对微生物进行全基因组范围的基因片段重组和交换；天津生药微生物菌种定向改良实验服务

    摘要：基因组重排技术是21世纪初发展起来的基于全基因组的定向微生物菌种改良技术.本文介绍了基因组重排技术的原理，并重点概述了基因组重排的具体过程，***对基因组重排技术的发展进行了展望.关键词：基因组重排;递推;原生质体融合;育种;基因组重排技术（genomeuffling）是一种基于整个微生物基因组重排的定向菌种改良技术，2002年，Zhang首先提出基因组重排这一概念：它无须提前知道菌株的代谢途径及基因表达调控机制等遗传背景，直接对微生物进行全基因组重排[1]，现在已被视为一种有效的微生物育种方法.1、基因组重排原理基因组重排是在传统诱变育种获得突变株后，通过递推式原生质体融合技术，对突变株的原生质体进行基因组重排，将正突变的基因集中在一起，从而**提升菌株的正向突变的频率及突变的速率.基因组重排技术一般被用于改良甚至改造微生物的基因，从而获得性状更加优良的表型.基因组重排技术与经典的杂交育种技术不同之处在于，后者在每次重排时只有两个亲本，然而基因组重排技术却是两个以上的多亲本杂交，并且通过反复的递推式杂交，从而产生很多表型改良显着的新突变株[1,2,3].2、基因组重排具体方法基因组重排技术通过模拟自然进化过程。天津生药微生物菌种定向改良实验服务

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