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北京多标记免疫组化分析服务 欢迎来电 上海朝瑞生物科技供应

上传时间:2020-06-11 浏览次数:
文章摘要:多光谱成像技术多光谱成像技术,可俗称免疫荧光多标,北京多标记免疫组化分析服务,即将我们常见的免疫荧光双标提高到六标,实现了在同一张组织切片上同时标记3~6种蛋白,解决了科研中经常遇到的标记蛋白种类太少,无法在同一张切片上观察不同细

多光谱成像技术多光谱成像技术,可俗称免疫荧光多标,北京多标记免疫组化分析服务,即将我们常见的免疫荧光双标提高到六标,实现了在同一张组织切片上同时标记3~6种蛋白,解决了科研中经常遇到的标记蛋白种类太少,无法在同一张切片上观察不同细胞或者多种蛋白分布情况的难题。那么多光谱成像技术是什么工作原理,同时又具有哪些更加强大的功能?

多光谱成像技术由多标染色、图像采集和图像分析三大模块组成。多标染色采用的是Opal/TSA多标记免疫荧光技术,打破了常规免疫荧光技术的局限性,不受一抗的种属来源限制,能够在同一组织切片样本上复染多达7种荧光标记(含DAPI在内)。图像采集采用了Vectra全光谱图像采集技术,这是***一代的组织切片成像分析系统,创新性的将光谱成像和切片全景扫描功能完美融合,实现了**性的技术跨越,通过光谱拆分能够去除自发荧光的干扰,北京多标记免疫组化分析服务,北京多标记免疫组化分析服务,有效识别多重荧光信号,从而获得***图像,确保能够进行精细的定量定位分析。


    6、Indo-1Indo-1是典型的双发射荧光探针,无钙时在485nm左右有发射峰,结合钙后,则在405nm处有发射峰,两者的比值与细胞内游离钙离子浓度成线性关系,将此比值与标准曲线相比即可得出细胞内游离钙浓度,因此,可利用此探针定量检测细胞内游离钙离子浓度。7、量子点(quantumdot)量子点是近年来研制的一种新型荧光染料,又称半导体纳米晶体,是由几百或几千个纳米级颗粒构成的半导体材料,性质稳定,溶于水,细胞本身不能合成和组装。量子点具有荧光时间长、产生多种颜色、检测方便和应用范围广等优点。8、辣根过氧化物酶辣根过氧化物酶是一种糖蛋白,由于在辣根中该酶的含量很高,故得名。它以铁卟啉为辅基,在过氧化氢存在时能催化苯酚、苯胺及其取代物聚合。通常用做光学和电子显微镜的组织化学示踪物。该酶比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以较为常用,不但可以用于免疫组化染色,也***运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。

    而高离子强度则有利于分解)11)DAB显色背景的深浅和特异性染色的深浅均可以由DAB孵育条件决定。DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现特异性染色较强而本底着色较浅时即可冲洗;DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间;此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间;DAB显色时间很长(如超过十几分钟)才出现阳性染色,一方面可能说明你的抗体浓度过低或孵育时间过短(比较好一抗4℃过夜);另一方面就是封闭时间过长。12)复染目的是形成细胞轮廓,从而更好地对目标蛋白进行定位,经常用苏木素复染(胞核染料)。注意苏木素复染时间要看当时的室温、溶液的新旧、目标抗原的定位等情况,一般数秒-数分钟,胞浆蛋白可以适当时间长一点,而胞**白则要短。不过这个如果染色不理想可以补救的。方法是:染色深则分化时间稍长些即可;染色浅则再置于苏木素中染色即可。盐酸酒精是分化,氨水是返兰。作用不同。片子复染完后流水振洗,然后置于盐酸酒精中数秒(一定动作要快)后拿出流水振洗。

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