每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数。每个模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系，起始拷贝数越多，Ct值越小。利用已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线，其中横坐标**起始拷贝数的对数，纵坐标**Ct值，上海病原微生物荧光定量PCR实验技术服务。因此，只要获得未知样品的Ct值，即可从标准曲线上计算出该样品的起始拷贝数。同时，对于荧光PCR实验来说，CT值也是判读样品阴阳性的重要指标，上海病原微生物荧光定量PCR实验技术服务。
大量的荧光定量PCR研究资料表明，病原体数量与***性疾病病情的轻重程度，上海病原微生物荧光定量PCR实验技术服务、传染性及***效果均有相关性。因此，通过荧光定量PCR方法得到的检测结果，一定程度上可以准确反映疾病***的情况。
实时荧光定量常用Taqman探针法和SYBR Green I法两类。
1.TaqMan探针法
TaqMan 探针法是具有高度特异性的定量PCR技术。它的工作原理为有一对 PCR 引物和一条探针存在于PCR 反应体系中，有荧光淬灭基团存在于3′
端标记，有报告基团存在于探针的5′ 端标记，探针*和模板特异结合，两条引物之间是其结合点。因此信号仪器搜集不到，伴随反应的进展，探针在外切核酸酶的活性的作用下被切断，从而造成淬灭基团不能吸收基团的荧光能量，从而使荧光信号产生，所以模板 DNA 的拷贝数取决于信号的强度。
2.SYBR Green I法
SYBR Green I为一种具有绿色激发波长的染料，其发射波长比较大约为 520 nm，比较大吸收波长约为 497 nm，能够结合所有的双螺旋小沟区域。由于处于游离状态，SYBR Green I发出的荧光较弱，然而其结合双链 DNA之后，就会使得荧光**增强，荧光信号的增加完全同步PCR 产物的增加。
在实时荧光PCR中。模板的定量有2种方法：***定量和相对定量。***定量一般通过已知的标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数；相对定量指在一定样品中靶序列相对于另一参照序列的量的变化
相对定量：相对定量法又分为两种
比较标准曲线的相对定量法：在一定样本中，靶序列相对于另一参照样本量变化情况进行分析的方法为相对定量法。在采用该方法过程中，需要有参照物，所以较容易绘制定量标准曲线，只要将标准品稀释度确定便可进行对比分析
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