植物RNA提取试剂产品特点:1.针对植物材料独特配置,操作更简单、流程更优化。2.配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。3.配有CS过滤柱,可有效去除其它杂质。4.RNA纯度更高,无杂质残留,特别适合于对纯度要求很高的下游实验。5.操作安全可靠,无需酚抽提,无需氯化铯梯度离心,无需氯化锂或乙醇沉淀。用途植物RNA提取试剂可从植物Chemicalbook组织,特别是富含多酚或淀粉的植物组织中(如马铃薯块茎、白松松针或嫩苗和西红柿叶等),提取高纯度的总RNA。操作步骤先将RNaseFree离心管置于干冰中再放入研磨好的冷冻的组织样品。准备新鲜植物组织,在液氮中研磨成粉状,如果是干种子,可在室温研磨。处理过的植物材料应一直保持置于-70℃冷冻保存,直至加入提取试剂并悬浮。总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。苏州RNA提取试剂服务电话
酵母RNA的提取方法:稀碱法是属化学破壁法,其方法是在一定碱浓度下,使构成细胞壁的蛋白质、脂肪及糖的化合物得到水解,从而破坏细胞壁,此法对碱的浓度及提取温度要求比较严格,碱的浓度不可过浓,应控制在1%,并且对提取温度也有一定的要求,提取时间短。因为在过分剧烈的条件下,容易使核糖核酸分子内的酯键断裂,使核糖核酸降解而影响收得率。酵母菌作为重要的模式生物,是遗传学和分子生物学的重要研究材料。由于酵母菌的细胞壁成分复杂,且较原核生物厚,难于破碎,因此酵母菌总RNA的抽提纯化要比原核生物总RNA的抽提纯化困难的多。如何有效地破碎细胞壁并保证RNA的完整性,是获得高质量酵母菌总RNA的关键问题。总RNA的提取方法还有很多,如Trizol法、异硫氰酸胍法、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、尿素法、十二烷基硫酸钠(SDS)法、热硼酸盐法等,这些方法各有优缺点,不同的方法适用于不同类型的材料。苏州正规RNA提取试剂产品介绍细胞质和细胞核RNA提取试剂盒特点:有效分离和提取细胞质RNA,与细胞核RNA。
Trizol是一种总RNA抽提试剂,内含异硫氰酸胍等物质,能迅速裂解细胞,压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol试剂可保持RNA的完整性,同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。异硫氰酸胍氯化铯超速离心法:原理:使用蛋白质变性剂异硫氰酸胍有效压制RNA酶的活性,经过起始密度为1.78g/ml的氯化铯介质,进行密度梯度超速离心,RNA沉淀于管底,而DNA与蛋白质在上清液中。使用这种方法,不但能得到高质量的RNA,而且能同时分离出细胞染色体DNA。
总RNA提取试剂是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便,颜色鲜明,便于分层。本试剂适用范围普遍,可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在总RNA提取试剂中被充分裂解的同时能够较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液会分成三层:上层无色水相、中间层和下层红色有机相,RNA分布在上清层中。收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,可用于各种分子生物学常规实验,如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、体外翻译等。很多RNA也需要通过碱基配对原则形成一定的二级结构乃至三级结构来行使生物学功能。
RNA提取真正需要注意的要点:你的植物组织样本采样、保存正常吗?组织裂解充分了吗?组织起始量是否过大?起始量过大的话,他们得带进去多少RNase呀,导致裂解液不能充分压制内源性的RNase,失败就在预料之中!你的细胞活性好吗?细胞都到衰亡期了,你提什么RNA呀;细胞加的那么多,破壁不充分,怎么裂解的好呢,他们本身得带进去多少内源性RNase污染呀!转移液体时吸到沉淀了吗?吸水相时碰到中间层了吗?乙醇干燥净了吗?裂解样本的过程是重中之重液氮研磨(手工):要先加液氮预冷一下研钵,然后研磨,研磨过程要保证研钵中一直有少量液氮,研磨完成一个样本后,直接加入裂解液涡旋震荡后放常温,或者直接丢到液氮中,全部研磨后一起加裂解液。液氮研磨(研磨仪):研磨模块丢到液氮中预冷,直到没有气泡冒出视为预冷完毕。在2ml圆底离心管(不需要无酶管,液氮研磨中不破裂就好)中加入5mm钢珠一粒,放进样品,投入液氮中预冷。把所有预冷好的离心管**研磨模块中,放进研磨机震荡20-30秒。完成后马上加裂解液,涡旋。RNA提取试剂销售厂家总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。RNA提取试剂注意事项:所有离心管,泵头及相关溶液都必须无RNA酶污染。苏州RNA提取试剂产品介绍
植物RNA提取试剂产品特点:配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。苏州RNA提取试剂服务电话
总RNA提取试剂是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验。是一种快速从组织细胞中提取总RNA的单相试剂。在样品裂解过程中TRIzol能够压制RNA酶活性保持RNA完整性;加入氯仿后离心,RNA相将与DNA和蛋白质分离,随后用异丙醇沉淀RNA。如果需要还可以继续提取DNA和蛋白质。纯化的总RNA可用于RT-PCR、NorthernBlot、RNA酶保护、Poly(A)mRNA纯化、体外翻译等实验苏州RNA提取试剂服务电话
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