苏州RNA提取试剂厂家 苏州君欣生物科技供应

miRNA是一类内源性的约22个核苷酸的非编码RNA分子，可参与转录后的基因调控。在细胞的分化和发育，细胞信号转导和对传染的应答等生物学过程中，miRNA发挥了重要作用。成熟的miRNA主要通过翻译压制来调控内源性基因的表达。miRNA的应用有miRNA模拟物和压制剂。miRNA模拟物是化学合成的双链RNA分子，通过传染到细胞中，模拟成熟的内源性miRNA分子；miRNA压制剂是单链经过修饰的RNA分子，通过传染到细胞中，特异性的压制miRNA的功能。miRNA模拟物和压制剂可以用于研究单个miRNA错误调节所造成的生物学影响，也能用于确定某个miRNA分子的特异性靶标基因。同时有研究发现miR-143可调控KRAS原病基因，为病症的医治提供了新的靶点和医治方法。在提取时，实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备，以防实验室污染。苏州RNA提取试剂厂家

RNA可分为：mRNA：在蛋白分子合成过程中，作为“信使”分子，将基因组DNA的遗传信息（即碱基排列顺序）传递至核糖体，使核糖体能够以其碱基排列顺序掺入互补配对的tRNA分子，进而合成正确的肽链，实现遗传信息向蛋白质分子的转化。tRNA：把氨基酸搬运到核糖体上，tRNA能根据mRNA的遗传密码，依次准确地将它携带的氨基酸，掺入正在合成的肽链中，实现肽链的延伸。与正在进行翻译的mRNA结合，而后rRNA将各个氨基酸残基通过肽键连接成肽链进而构成蛋白质分子。rRNA：一般与核糖体蛋白质结合在一起，形成核糖体。苏州RNA提取试剂厂家试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料。

总RNA提取试剂，适用于动植物细胞或组织及细菌的总RNA抽提，可有效防止RNA在提取过程中的降解。获得的RNA可直接用于Northern杂交，纯化mRNA，体外翻译，RNase保护实验，RT-PCR以及cDNA克隆等一系列操作。该试剂可用于100次总RNA提取（10平方厘米细胞或100mg组织）。总RNA提取试剂注意事项：1，RNA提取过程中所用器皿、离心管、吸头等应保证无污染无RNA酶。操作中应小心，防止外源性RNA酶污染样品导致RNA样品降解。2，试剂中含有酚等有害物质，注意个人防护。自备新开封或专门氯仿，异丙醇，75%乙醇，DEPC处理水。

拭子RNA提取试剂的选择？拭子样本的量与提取的核酸量成正比，如果要提高核酸得率，也可通过增加样本量来实现。一般先取一根拭子的涮洗液样本，然后进行提取，如结果不理想可考虑增加样本量或重新采样。但如果增加样本量或重新采样还不能得到满意结果，应及时考虑更换试剂盒。目前国内常用的拭子核酸提取试剂有Q、Biog等。根据我们的经验，Q和T品牌试剂盒的拭子RNA提取得率（一根口腔拭子在口咽部来回刮擦10次）在0.5-3.5ug。同样处理的口咽拭子，Biog试剂盒的提取得率在1-4ug，基本上都能满足下游PCR相关实验的要求。植物RNA提取试剂：可从植物组织中快速提取总RNA，可同时处理大量不同样品。

RNA提取注意事项：所有实验所用的泵头、离心管等消耗品均要使用RNase-free的；整个过程要在无RNase污染的条件下进行，通常可以在无菌操作台中进行实验，并用75%的酒精进行擦拭杀菌，如有必要也可在实验前喷洒一些商用的RNase压制剂；所有相关溶液的配制要使用RNase-free水或DEPC水(包括75%酒精也需要用无水乙醇与DEPC水配制)；溶液的配制使用移液器进行操作，切勿使用量筒等中间器皿；研钵、研棒、镊子、剪刀等用锡箔纸包好后，200℃干热灭菌4h；实验过程中一定要戴手套和口罩；异丙醇、氯仿、乙醇等试剂要使用未开封的，或者开封之后直接分装至小容量离心管的，以避免多次使用的交叉污染；植物花总ＲＮＡ提取试剂盒：40~60分钟内即可完成提取过程，提取的总RNA纯度高。苏州RNA提取试剂厂家

RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。苏州RNA提取试剂厂家

动物细胞RNA提取：1、悬浮细胞：可直接离心后弃掉培养基，用无菌PBS清洗1~2遍后，再用适量PBS悬浮起来，然后再加入裂解液进行裂解。千万不要完全弃掉液体后，往沉淀细胞里直接加入裂解液，这样会使外表层的细胞裂解后释放的组蛋白包裹粘附在沉淀细胞外侧，从而限制沉淀内部的细胞与裂解液的接触，从而导致细胞裂解不彻底，降低RNA得率。2、半贴壁或贴壁不紧的细胞：弃掉培养基后，用PBS洗1~2次，然后直接吸取适量PBS用吸管或者泵吹打培养皿，把细胞吹下来，转移到无RNA酶的EP管中，加裂解液进行提取。苏州RNA提取试剂厂家